Petrovsky prospect 2, building 3
St. Petersburg
St. Petersburg
Mon-Sat: 8:30 - 20:30
Sun: 10:00 - 17:00
Sun: 10:00 - 17:00
Услуги лабораторииTimelapseRi-WitnessЭКО/ИКСИПИКСИIVMв клинике NGC Санкт-Петербург
С того момента как эмбриолог получает пробирку с фолликулярной жидкостью, начинается эмбриологический этап процедуры ЭКО. Мы описали все основные процессы, которые происходят в эмбриологической лаборатории: оплодотворение, культивирование, биопсия трофэктодермы для проведения генетической диагностики (PGT-A), крио- , расконсервация и хранение биоматериала, а также работа с тканями яичника для сохранения фертильности.
Оплодотворение эмбрионов
Полученные в результате пункции фолликулов яйцеклетки в чашке Петри помещают в инкубатор. В это время эмбриологи определенным образом подготавливают сперму для их оплодотворения.
Через 2-4 часа проводится оплодотворение: сперматозоиды в строго определенном количестве добавляют к каждой яйцеклетке, после чего чашки возвращают в инкубатор.
Результаты оплодотворения оцениваются на следующее утро. В последующие дни эмбриологи оценивают развитие эмбрионов. На пятый день развития происходит формирование бластоцисты.
ЭКО
Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) – методика оплодотворения яйцеклеток приготовленной и очищенной спермой партнера (донора). Основана на добавлении фракции активно подвижных сперматозоидов.
Предварительно сперма центрифугируется и концентрируется. Таким образом, в малом объеме жидкости оказывается наибольшее количество сперматозоидов, способных оплодотворить ооциты.
Спустя 16-18 часов оцениваются пронуклеусы: то есть появление в яйцеклетки двух ядер: мужского и женского. Если ядра появились, значит сформировалась зигота – оплодотворенная яйцеклетка человека.
ЭКО + ИКСИ
Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) – механическое внедрение сперматозоида внутрь ооцита. С помощью специального манипулятора и микроинструментов – эмбриолог выбирает и отлавливает наиболее активный и морфологически нормальный сперматозоид, затем помещает его в ооцит.
Когда проводится ИКСИ?
ЭКО+ИКСИ, как правило, используется при наличии мужского фактора бесплодия или оплодотворение витрифицированных ооцитов.
ЭКО + ПИКСИ
При ИКСИ выбор сперматозоида для инъекции происходит субъективно: на основе морфологических характеристик.
ПИКСИ – метод, основанный на неспособности сперматозоида с незрелой ДНК связываться с гиалуроновой кислотой, позволяющий оценить не только морфологию, но и способность пройти природный барьер – оболочку яйцеклетки.
На чашки наносят гиалуроновую кислоту, сперматозоиды прикрепляются, далее эмбриолог с помощью микроинструментов забирает прикрепившиеся сперматозоиды, и производит процедуру ИКСИ.
ЭКО + IVM
IVM (In Vitro Maturation) – процедура основана на получении незрелых ооцитов на стадии GV, далее к таким ооцитам добавляют фолликулостимулирующие и лютеинизирующие гормоны, культивируют и получают зрелые ооциты (метафазы II), готовые к оплодотворению.
Данная методика показана для группы пациентов, которой невозможно провести симуляцию.
Стадии развития яйцеклетки
Герминальный везикул (GV); метафаза I (М I) – незрелая яйцеклетка (ооциты метафазы М I могут дозреть до метафазы М II)
Метафаза II (М II) – зрелая яйцеклетка.
Культивирование эмбрионов
Основная цель данного этапа – культивирование эмбрионов до стадии бластоцисты для последующего переноса в полость матки или заморозки. Эмбрионы культивируются в специальных инкубаторах, которые подразделяются на «планшетные» и инкубаторы со встроенной системой Time-Lapse.
В клинике NGC все эмбрионы культивируются в инкубаторах со встроенной системой Time-Lapse.
Time-Lapse – система круглосуточного наблюдения за развитием эмбрионов в режиме реального времени. По сути, это специальный микроскоп, который устанавливается внутрь инкубатора. Он фотофиксирует и сохраняет изображения через регулярные короткие интервалы. Фотографирование каждого эмбриона происходит с момента оплодотворения и на протяжении всего периода инкубации.
Time-lapse позволяет
Наблюдение
За развитием эмбриона 24/7
Отсутствие "стресса"
не причинять эмбриону «стресс», постоянно вынимая его
Стабильность
сохранять стабильную температурную и газовую среду
Информация
получать детальную информацию о развитии эмбриона
Этапы развития эмбрионов
Генетическая диагностика
Биопсия трофэктодермы – технология забора генетического материала у эмбриона, находящегося на стадии бластоцисты. Главная цель – получение клеток для дальнейшего проведение преимплантационного генетического тестирования (PGT-A NGS). Микроманипуляция производится, как правило, на 5/6/7 сутки развития эмбриона.
С помощью микроинструментов эмбриолог удерживает бластоцисту и захватывает несколько клеток трофэктодермы (оболочки бластоцисты).
Полученные клетки (биоптат) отмывают, помещают в пробирку и отправляют в генетическую лабораторию для последующего исследования. В Next Generation Clinic генетическая лаборатория расположена на базе клиники, что очень удобно и безопасно, ведь нет необходимости в транспортировке биоптатов.
Получение биологического материала для NiPGT эмбрионов – неинвазивная методика, которая может быть альтернативой стандартному PGT-A на клетках трофэктодермы. Забирается среда в которой рос и развивался эмбрион, в эту среду эмбрион в процессе развития выделяет ДНК, таким образом на основании исследования этой внеклеточной ДНК делается вывод о пригодности эмбриона к переносу.
Заморозка и хранение
Заморозка биоматериала и хранение его в криобанке – важный аспект работы эмбриологической лаборатории.
Заморозка используется в программах ЭКО с преимплантационной генетической диагностикой, программах «отложенного материнства», банкинга, сохранения фертильности. Также витрификация биоматериала позволяет организовывать банки донорского биоматериала.
Витрификация ооцитов – метод сверхбыстрого замораживания ооцитов с помощью проникающих в клетку криопротекторов, которые замещают воду и не допускают образования кристаллов воды. Клетки подвергаются воздействию криопротекторов, далее криоконсервируются в жидком азоте.
Криоконсервация спермы – метод сохранения сперматозоидов, с помощью непроникающих в клетки криопротекторов, который добавляют к эякуляту перед замораживанием. Он препятствует сморщиванию клеток, влияя на обмен ионов, и уменьшая образование кристаллов льда. Криоконсервация включает в себя процессы первоначальной выдержки в растворе криопротектора, охлаждение и хранение.
Витрификация эмбрионов – заморозка эмбрионов проводится методом витрификации. Необходимо добиться сохранения внутренней структуры и функциональных качеств эмбриона в процессе заморозки и разморозки. Это достигается правильным дегидратированием клеток, что исключает возможность образования кристаллов воды, которые могут повредить клетку. Поэтому вся процедура связана с замещением воды криопротекторами.
"При наличии хороших системах криоконсервации и высокой квалификации эмбриолога – криоконсервация не снижает качество эмбриона. Благодаря крио, очень многие врачи переходят на отложенный перенос – делая перенос не в том же цикле, в каком была стимуляция. Это повышает шансы на имплантацию. В нашей клинике мы морозим эмбрионы по одному, чтобы точно знать на каком криотопе «кто» лежит. Таким образом, для переноса в полость матки выбирают лучшие по качеству эмбрионы".
Павлова Марина Николаевна
Заведующая эмбриологической лабораторией
Заведующая эмбриологической лабораторией
Криобанк
После заморозки биоматериал хранится в криобанке. Криобанк – это система хранения биологического материала (спермы, ооцитов, эмбрионов) пациентов клиники и доноров. Биоматериалы хранятся при температуре -196°С в сосудах Дьюара, наполненных парами жидкого азота. Они могут находиться там на протяжении многих лет.
При этом репродуктивные клетки сохраняют свою способность к оплодотворению без потери эффективности.
Сохранение фертильности: использование тканей яичника
Для сохранения фертильности существуют возможности использования тканей яичника пациенток. Актуально для тех, кто планирует химио- или радиотерапию, а также оперативное лечение.
Для сохранения фертильности используют несколько методов:
- Можно получить ткань яичника при оперативном вмешательстве, из этой ткани выделить не зрелые клетки и осуществить дозревания клеток in vitro.
- Также оставшуюся ткань можно подвергнуть криоконсервации. Она осуществляется медленным способом, с использованием не проникающих в ткань криопротекторов.
2.1) В дальнейшем такие кусочки ткани можно трансплантировать обратно в организм пациентки. Такие трансплантаты способны вырабатывать гормоны, что очень важно для того чтобы избежать климакса у женщин с полностью удалёнными яичниками. Кроме того, существует возможность роста фолликулов в таких трансплантатах. Таким образом, у пациенток возможно наступления беременности естественным путем или с помощью вспомогательных репродуктивных технологий.
2.2) Не зрелые клетки после дозревание можно заморозить, либо оплодотворить и криоконсервировать уже полученные эмбрионы
Онкология и сохранение фертильности.
Благодаря современным методам лечения, значительно вырос процент полного излечивания пациентов после онкологических заболеваний. К сожалению, у методов борьбы с онкологией есть нежелательные побочные эффекты, главный из которых – снижение или даже полная утрата фертильности.
Но сегодня пациентки не должны платить за победу над болезнью такую высокую цену!
Но сегодня пациентки не должны платить за победу над болезнью такую высокую цену!
